我们最早知道“克隆”,是来自一只名叫“多利”的绵羊。它让我们发现,动物繁衍,可以不需要有性繁殖的方式。最近一只名叫“大蒜”的小猫引起了社会的关注,因为它是中国第一只克隆猫。如今“大蒜”已经满月,记者近日探访,看到小家伙正在快速成长,身体健康,性格活泼。
克隆出“大蒜”的是中关村昌平园一家名为“北京希诺谷生物科技有限公司”的民营企业,该企业的创始团队大多是中国农业大学的毕业生。在克隆出“大蒜”前,他们还研究诞生了中国第一只体细胞克隆狗“龙龙”。企业副总经理赵建平告诉记者,如今越来越多狗、猫宠物走进家庭,成为人们的情感伴侣,猫狗毕竟寿命有限,但通过克隆技术可以最大程度延续这一份陪伴的感情。此外克隆技术未来在拯救濒危动物方面也预期有非常广泛的用武之地。
克隆猫之前先完成了更难的克隆狗
赵建平说,如今所谓的克隆,是指生物体通过体细胞进行无性繁殖,以及由无性繁殖形成的基因完全相同的动物种群。因此哺乳动物的克隆并不需要精子这样的生殖细胞,即使“借用”下卵细胞,也只是用下它的细胞营养成分,而不需要具有遗传物质的细胞核。
1996年7月5日,克隆羊“多利”出生轰动全球,此后20多年,科学家们相机克隆出了鼠、牛、猪等20多种动物,但克隆狗却迟迟没有成果,一直到2005年才由韩国科学家取得了首次突破。在中国,克隆狗则一直是技术空白。“我们从2015年开始决定全力攻坚克隆狗,并以此作为企业的发展方向。”赵建平说,他们还做过半年的市场调查和技术论证。这一年,基因编辑在科学界大热,宠物市场也在持续升温,越来越多人将宠物狗迎进家门,当作感情伴侣。
赵建平说,克隆狗和克隆其他动物的技术路线差不多,都是需要将供体的体细胞细胞核移植到其他狗去掉了细胞核的卵母细胞内,然后逐步培养成克隆胚胎,再通过手术将胚胎移植到代孕犬体内发育成熟,然后分娩产出。但实际操作,克隆狗的难度却要大得多,一方面狗的发情周期间隔比较长,一年发情1-2次;另一方面,狗的卵子还没成熟就进入输卵管,这就必须通过检测,准确判断卵母细胞的成熟时间,事实上,品质好的卵母细胞成熟窗口期只有1,2个小时,所以获取高质量成熟卵细胞的时间点特别短,必须精准掌握。
2017年5月28日,中国首例克隆犬在赵建平和同事们的实验室里诞生。它被命名为“龙龙”。“龙龙”也是世界首例基因编辑克隆犬,填补了我国克隆犬领域的空白,使我国在基因编辑犬和体细胞克隆犬研究领域处于世界领先地位。“从现在回过头看,克隆猫应该是比克隆狗稍微要要容易一点。我们之前的研究也为后来克隆‘大蒜’打下了坚实基础。”赵建平说。
一块腿部的表皮克隆出了“大蒜”
“大蒜”是一只普通的英国短毛猫,陪伴了主人黄雨近三年的美好时光。今年年初,“大蒜”因为泌尿道疾病去世,这令黄雨伤心不已。他找到了“希诺谷”团队,希望能通过再克隆一只“大蒜”延续这一份陪伴。“我们经过评估后接受了这项任务。”赵建平说。
工作人员从刚去世不久的“大蒜”腿部采集了一块表皮,然后第一时间带回公司的实验室提取体细胞,之后跟去核的卵母细胞进行融合,生成克隆胚胎,激活后的胚胎再植入代孕猫的子宫内。在胚胎移植66天后,今年7月21日,代孕猫经过自然分娩,顺利生产出克隆猫“大蒜”。
日前记者在“希诺谷”的实验室里见到了正在快速成长的“大蒜”。小家伙和代孕的“母亲”各自拥有一栋“别墅”,还有一片开阔的运动场地,足够他撒欢儿。小家伙身长已经有20多厘米,它有些怕生,见到有人来探望,立即躲进了自己屋里,过了几分钟,感觉外面还是安全的,又忍不住钻了出来,看了记者一眼,就开始跟自己最喜欢的小球做游戏,好像是在展示自己的才艺。
记者注意到,工作人员在定期记录“大蒜”的生长情况,8月7日大蒜体重321克,到了8月30日,它的体重就增长到了653克,“它的生长发育非常好,跟普通幼猫的成长没有区别。”工作人员说,虽然是从体细胞经克隆技术诞生,但“大蒜”未来生育等各方面功能都不会受到影响。按照计划,“大蒜”过了两个月生日,就可以离开实验室,回到主人的怀抱。
记者注意到,克隆猫“大蒜”和它之前的本体在外貌上还是有一定的细微差别。比如本体下巴上有一个黑色的小块,而克隆猫没有了;本体左腿上有花纹,克隆猫的花纹长在右腿上。赵建平说,毛色,主要由细胞核中的DNA决定,也和细胞质中的线粒体表观遗传有关,同时,代孕犬猫在孕期,环境因素包括应激、温度都可能影响毛色多基因的随机性表达。所以有条纹、斑块和斑点的克隆动物即使超过99.9%基因相同,但是外观上依然可能存在一定差异,这是克隆技术目前无法控制的。另外无论是克隆猫还是克隆狗,因为后天饲养条件、生长环境跟本体不可能完全一样,因此性格等方面也会有一些差异。同时克隆动物没有被克隆动物的记忆。
克隆技术有助拯救濒危动物
在赵建平看来,奇妙的克隆技术已展示出广阔的应用前景。比如可以培育优良的畜种或者特殊用途动物,“比如警犬、军犬,对品种要求很高,通过普通人工繁育,下一代很可能会表达出一些不好的隐性基因,但克隆就不存在这个问题,可以最大限度维持个体的优良水平。”赵建平说。
同时,克隆还可以用于生产转基因动物、生产 胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法。可以复制濒危的动物物种,用于保存和传播动物物种资源,维持生态平衡。比如克隆猫就属于猫科动物,与猪狗相比,它在物种上与华南虎、大熊猫等濒危动物更加接近,便于开展研究。另外在江豚、中华鲟等保护方面,克隆技术也有应用可能,“当然这需要国家相关部门提供政策、资源、资金等方面的支持,只要国家需要,我们愿意全力提供技术服务。”赵建平说。
不过在业内人士看来,克隆技术最先走向商业化,也最有可能取得成功的是在宠物市场。记者了解到,克隆猫“大蒜”的费用是25万元。而克隆难度更大的狗,每只费用更是高达38万元。据悉,“希诺谷”已经完成数十例克隆狗,克隆猫的订单也已经源源不断进入胚胎培育阶段,有的已经植入代孕猫体内。
《2018年中国宠物行业白皮书》显示,2018年中国宠物消费市场规模达到1708亿元,同比2017年增长了20.5%,其中宠物狗市场规模1056亿元,宠物猫市场规模652亿元,而中国城镇养狗、养猫人群已经达5648万人。越来越多狗、猫宠物走进家庭,成为人们的情感伴侣,猫狗毕竟寿命有限,但通过克隆技术可以最大程度延续这一份陪伴感情,人们可以享受“昨日重现”般的温暖。这里面有惊人的消费潜力。
【关于克隆的小知识】
1.克隆动物寿命正常吗?会不会早衰?
从克隆羊多利到现在,已经有22年的动物克隆历史了,在这段期间,大量物种、数以万计的动物已经实现克隆。根据科学家的研究和统计,证实克隆动物与正常繁育的动物享有同样的生命力,它们在寿命、繁殖、生理状态等方面并没有明显差异。
而克隆羊多利之所以只活了六年多,是因为感染了严重的肺部疾病和关节炎,与遗传物质和克隆技术没有直接关系,与它同样被克隆出来的羊并没有短寿,而是活到寿终正寝。
胚胎本身在形成时会进行重编程,这个过程会修复细胞端粒恢复至初始状态.克隆技术在制备重构胚时通过融合激活同样会进行重编程。并且端粒说在科学界目前并没有被证实影响动物寿命,没有必然联系。
2.被克隆的狗现在患有肿瘤,能克隆出健康的狗吗?
克隆实验并不会因为被克隆体当前的健康状况影响,在取样时避开肿瘤区域即可。新生的克隆狗是健康的。肿瘤的产生是遗传因素与外源因素交集作用的,本体患有肿瘤,并不代表克隆体未来就一定患有此类肿瘤。
3.克隆宠物如何提取体细胞?
以狗为例,一般是在其大腿内侧,剃毛后消毒,用取样器取3毫米大小的两块皮肤,取下的皮肤样品会尽快带回实验室进行细胞培养。一般两周后即可建立体细胞系。取皮肤样本对狗的伤害极小,不出血,不需要麻醉,之后可自行恢复,比狗狗玩耍时不小心刮掉一小块表皮还要轻微。
4.克隆宠物采集样本还有何注意事项?
如果动物已经去世,有条件的话,使用潮湿的浴巾包裹尸体,放在冰箱中冷藏。一般狗不超过一周,猫不超过3天,尽快联系希诺谷进行取样工作,都是有机会采集到活的体细胞的。注意千万不要冷冻。一般情况下尸体冷冻后就无法采集到活的体细胞了。
【中国克隆技术发展】
作为新世纪的尖端科学,克隆技术从它诞生的那一刻起就吸引了众多世人的目光。据目前的状况来看,克隆作为新兴的技术在中国得到前所未有的关注而且硕果累累:
1、2000年6月16日,由西北农林科技大学动物胚胎工程专家张涌教授培育的世界首例成年体细胞克隆山羊“元元”在该校种羊场顺利诞生。“元元”由于肺部发育缺陷,只存活了36小时。同年6月22日,第二只体细胞山羊“阳阳”又在西北农林科技大学出生。2001年8月8日,“阳阳”在西北农林科技大学产下一对“龙凤胎”,表明第一代克隆羊有正常的繁育能力。
2、2002年5月27日,中国农业大学与北京基因达科技有限公司和河北芦台农场合作,通过体细胞克隆技术,成功克隆了国内第一头优质黄牛——红系冀南牛。这头名为“波娃”的体细胞克隆黄牛经权威部门鉴定,部分克隆技术指标达到国际水平。
3、2002年10月16日中午,中国第一头利用玻璃化冷冻技术培育出的体细胞克隆牛在山东省梁山县诞生。在此之前,中国一直沿用的是鲜胚移植技术,尚未有利用冷冻技术克隆成功的先例。
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